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观察不同初始密度的细胞生长变化
细胞培养是生物学研究中,一类重要的实验方法。细胞养不好,细胞生物学研究也就无从谈起。影响细胞培养状态的因素有很多,细胞的密度,就是其中重要的一项。通常,细胞密度是指每单位面积或体积的细胞数。
那么在不同初始密度下接种的不同细胞分别有什么不一样的变化呢?
实 验 过 程
将293T细胞、HELA细胞、B16细胞分别以初始密度1K/2K/5K/10K/15K/20K接种至24孔板中,用CELLImage Mini全自动活细胞成像仪对24孔板持续明场96小时监测,分别间隔2小时采集一次图像,在终点试验前检查生长情况。随着时间的推移,活细胞成像设备可以用来准确地、无标记的记录细胞的形态变化和增殖变化,如图所示。
实 验 结 果
通过CELLImage Mini全自动活细胞成像仪观察比较三种不同细胞系中细胞播种密度依赖性增殖的变化,并且用仪器自带的Readcells软件AI智能算法对其分析定量生成生长曲线,如上图显示仪器可以有效的识别三种不同形态的细胞并计算生长面积,了解细胞播种差异对细胞增殖的影响对于控制试验变异因素是很重要的。另外,观察三种细胞的增殖曲线变化,可以发现293T细胞增殖呈现异常,追溯此前的培养过程可能是由于细胞经过长时间饥饿处理导致其状态受到影响,进而影响其传代后的正常增殖过程。
细胞培养的适宜细胞密度取决于特定的细胞类型和培养目的。不同的细胞由于来源不同,特性也会有所不同,有的细胞比较依赖于高密度才能生长,所以在进行复苏、传代等操作时对其密度需要注意;生长速度慢的细胞,譬如内皮细胞,初始细胞密度略高一些,生长状态会比较好;还有一些细胞生长速度比较快,如巨噬细胞或某些肿瘤细胞,初始细胞密度较低更有利于其状态的调整。
总 结
通过培养箱内实时活细胞分析,可以随时间全自动跟踪和量化细胞的生长,并且得到的结果是非常可信的。整个动态监测过程中的图像采集是完全无标记,对细胞低干扰的,从而有机会在细胞生长最适宜的环境下捕捉到完整的、动态的、长期的细胞生长变化过程。仪器软件自带智能AI分析功能,可以输出细胞融合度、生长曲线、延时动态视频等分析数据,给研究者提供最直观的细胞实验结果,呈现实验中的变化差异。