脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高。脂质体作为一种工具，目的是体内或体外输送载体，中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内； 阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA-阳离子脂质体复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞 。

    实 验 准 备    

一般细胞转染需要24h-72h，所以要充分了解细胞生长速度，计算所需脂质体和DNA的储备量，并确认有足够的下列材料：Opti-MEM无血清培养基或者高糖无血清DMEM，Lipofectamine转染试剂，DNA，离心机，培养板，微量移液器，离心管等。

    实 验 过 程    

铺板：在转染前一天（18-24h）将293T细胞传代至24孔板中，使细胞第二天融合度达到70%-80%。

换液：次日在转染实验前，用含血清不含抗生素的培养基对细胞进行换液。（抗生素的存在对于有些细胞容易导致转染后出现一定细胞毒性）

混合质粒：参考使用说明，进行质粒和试剂配制混合。本次实验组数如下：

 

监测成像：实验全程用CELLImage Mini全自动活细胞成像仪在培养箱内自动对细胞进行长时间、无干扰的动态监测。

    实 验 结 果    

在阳离子脂质体转染细胞实验中，CELLImage Mini全自动活细胞成像仪可以对推荐用量DNA、推荐用量减半DNA转染的293T细胞很好的进行荧光成像。

 

 

 

    总    结    

CELLImage Mini全自动活细胞成像仪，可用于各种基于细胞的研究。该系统基于先进的荧光(绿/红)和光学显微镜技术，优化了荧光滤光片和光路，于细胞转染效率或监测转染效果可获得清晰的细胞图像。此外，成像仪内部装载有一个隐藏式的高精度载物台，让您可以在更稳定的条件下观察活细胞的生长变化，观察不同孔位的细胞无需移动孔板样本，减少对细胞震荡和应激，实现无干扰的对多点位细胞进行长时间的动态监测，给您带来可信度极高的细胞实验结果。